近日，有客戶就樣品的搜集以及保存的問(wèn)題來(lái)電，期望我司能給出主張，正確的搜集和保存也是保證實(shí)驗(yàn)成功的重要根底。
操作過(guò)程：
1）運(yùn)用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生很多的泡沫，以免加樣時(shí)參加很多的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2）依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測(cè)樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標(biāo)板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測(cè)定結(jié)果。
9）在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。

樣品的搜集和保存
1）血清-----操作過(guò)程中防止任何細(xì)胞刺激。運(yùn)用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。搜集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞敏捷小心地分離。
2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3）細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4）組織勻漿-----將組織參加適量shengli鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
5）保存------假如樣品不當(dāng)即運(yùn)用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，防止重復(fù)冷凍。盡可能的不要運(yùn)用溶血或高血脂血。假如血清中很多顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱凍結(jié)。進(jìn)口elisa試劑盒應(yīng)在室溫下凍結(jié)并確保樣品均勻地充分凍結(jié)。